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熒光分光光度計是一種常用的實驗儀器,用于測量物質(zhì)的熒光強度和熒光光譜。在使用熒光分光光度計之前,需要對其進行校準,以確保測量結(jié)果的準確性和可靠性。本文將介紹一種常用的熒光分光光度計校準方法。
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在測量之前,需要對熒光分光光度計進行零點校準。將熒光分光光度計的樣品池中注入純?nèi)軇?如去離子水或甲醇,確保熒光強度為零。根據(jù)熒光分光光度計的型號和使用說明書,進行相應(yīng)的零點校準操作。
完成零點校準后,將樣品池中的標準溶液放入熒光分光光度計中進行測量。在測量過程中,確保樣品池中的溶液均勻攪拌,以消除懸浮物或沉淀對測量結(jié)果的影響。
根據(jù)熒光分光光度計的測量結(jié)果,繪制熒光強度與標準溶液濃度之間的曲線。這條曲線被稱為熒光校準曲線,用于后續(xù)測量樣品的熒光強度轉(zhuǎn)換為濃度。
準確性,可以重復(fù)上述操作,測量多次不同濃度的標準溶液,并繪制多條熒光校準曲線。然后,可以通過擬合曲線的方法選擇校準曲線,以減小測量誤差。
在實際測量樣品的熒光強度時,將樣品池中的待測樣品放入熒光分光光度計中進行測量。根據(jù)熒光校準曲線,可以將測量得到的熒光強度轉(zhuǎn)換為樣品的濃度。需要注意的是,在測量之前,需要對樣品進行適當?shù)奶幚?,以提取熒光物質(zhì)并消除其他干擾。
除了校準曲線,熒光分光光度計還可以進行其他校準操作。例如,可以進行儀器響應(yīng)校準,即通過測量已知濃度的標準溶液,來確定熒光分光光度計的響應(yīng)系數(shù)。此外,還可以進行熒光強度漂移校準,即定期測量已知濃度的標準溶液,以檢測儀器的長期穩(wěn)定性和準確性。
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